技術文章
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技術文章
2025-818
GST標簽蛋白(谷胱甘肽S-轉移酶標簽蛋白)是一種廣泛用于分子生物學中的融合蛋白標簽。GST是一種催化藥物代謝的酶,能夠與谷胱甘肽(GSH)結合。通過在目標蛋白質上附加GST標簽,可以方便地純化目標蛋白,并進一步分析其功能和性質。GST標簽的優勢:1.提高蛋白表達:有助于蛋白質的表達,因為GST本身能穩定目標蛋白,減少其在細胞內的降解。2.高親和力結合:GST與谷胱甘肽的結合具有非常強的親和力,這使得GST標簽在目標蛋白純化中非常有效。GST標簽在蛋白純化中的應用:1.融合表...
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2025-818
一、腦內的"警報蛋白":S100β的雙重身份揭秘在中樞神經系統的精密網絡中,S100β蛋白如同一位矛盾的"雙面間諜"——它既是星形膠質細胞釋放的神經營養因子,也是腦損傷時拉響警報的炎癥介質。這種21KDa的鈣鋅結合蛋白,因在腦損傷后隨血腦屏障破壞而大量釋放入血,被稱為腦部的"C反應蛋白"。正常生理狀態下,它在血液和腦脊液中濃度極低,而當神經細胞遭受創傷或病變時,其水平會呈指數級飆升,成為監測腦損傷的特異性生物標志物。S100β結構二、分子架構與信號網絡:S100β的"鈣敏感開...
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2025-818
你的磷酸化抗體,可能正在毀掉實驗?蛋白磷酸化作為信號通路研究的"黃金指標",其檢測堪稱科研人必修的"顯微鏡級"技術活。Westernblot雖為常規手段,但磷酸化檢測的特殊性,讓每個環節都藏著"翻車風險"。今天就來拆解這套"高難度動作"的正確打開方式——一、解碼樣品:先摸清磷酸化蛋白的"脾氣"磷酸化蛋白往往是細胞里的"特殊玩家",想讓它們"現身"得用點巧勁:刺激誘導有講究:物理/化學刺激是激活磷酸化的常用手段,但時間和強度堪稱"玄學"——查文獻+預實驗是捷徑(比如某細胞因子可...
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2025-815
基因的"分子印章":DNA甲基化的原理與定義在基因組的"書寫系統"中,DNA甲基化如同一種隱形的"分子印章"——在DNA甲基轉移酶(DNMT)的催化下,S-腺苷甲硫氨酸(SAM)提供甲基基團,將胞嘧啶(C)修飾為5-甲基胞嘧啶(5mC),主要發生在哺乳動物的CpG二核苷酸位點(圖1)。這種修飾不改變DNA序列,卻能像"基因開關"般調控染色質構象與基因表達,堪稱表觀遺傳學的"基礎語法"。其中哺乳動物細胞中甲基化主要發生在CG雙核苷酸的胞嘧啶上(GoldbergAD,2007),...
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2025-815
結直腸癌(CRC)是成本最高的健康問題之一,在發達國家癌癥相關死亡率中第二。轉移性CRC的預后較差,5年生存率低于15%。因此,發現能夠實現CRC早期診斷、準確預后和個性化治療的分子標志物極為重要,這仍是該領域的一項挑戰。許多蛋白質已被確定為具有臨床價值的潛在生物標志物,它們幾乎是所有細胞功能的直接執行者。此外,蛋白質的顯著多樣性因眾多翻譯后修飾(PTM)而增加,這些修飾可以快速、可逆地響應環境或細胞內刺激,最終將成為有價值的生物標志物候選資源。目前,基于質譜的蛋白質組學能夠...
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