小鼠T細胞激活試劑盒

Starter Bio推出的小鼠T細胞激活試劑盒（UA090032）通過創新技術整合，為研究者提供了標準化程度高、可重復性強的實驗解決方案。

本試劑盒采用抗體包被磁珠技術，通過精準控制CD3ε（Clone 145-2C11）與CD28（Clone 37.51）抗體的表面包被濃度（分別達到0.5μg/10? beads和1.0μg/10? beads），實現T細胞受體（TCR）與共刺激信號的雙重激活。經流式細胞術驗證，該技術可使初始T細胞在72小時內達到98%的CD25+CD69+雙陽性率，顯著優于傳統抗體混合刺激法（p<0.01）。

技術參數優勢：

1. 磁珠粒徑優化：直徑4.5μm的順磁性磁珠通過表面修飾技術，實現抗原呈遞面積與細胞結合力的最佳平衡，實驗數據顯示細胞存活率≥95%（72h培養）

2. 細胞因子協同體系：包含重組小鼠IL-2（20ng/mL工作濃度），其比活性經ELISA驗證達≥1×10? IU/mg，有效維持Th1細胞分化

3. 無血清培養體系：采用GMP級培養基配方，避免異源蛋白干擾，支持長達14天的連續擴增培養

在實驗應用方面，本試劑盒已通過多中心驗證，適用于：

• 過繼性免疫研究中的T細胞擴增

• CAR-T細胞制備的預處理階段

• 腫瘤微環境中的T細胞耗竭模型構建

• 免疫檢查點抑制劑體外藥效評估

產品配套提供經γ射線滅菌的即用型試劑組件，包含：
• 預包被磁珠（2×10? beads/mL）
• 500×細胞因子濃縮液
• 優化基礎培養基
• 無菌處理細胞培養板

研究人員可參考隨附的標準化protocol（包含梯度激活比例建議與代謝監測方案），在常規CO?培養箱中即可完成從初始T細胞分離到高純度效應T細胞獲取的全流程操作。經三次凍融循環測試，各組分穩定性符合ICH Q1A標準要求。

關于斯達特(Starter)，國產抗體專家：
杭州斯達特志在為全球生命科學行業提供優質的抗體、蛋白、試劑盒等產品及研發服務。依托多個開發平臺：重組免單抗、重組鼠單抗、快速鼠單抗，重組蛋白開發平臺 (E.coli,CHO,HEK293,InsectCells)，已正式通過歐盟98/79/EC認證ISO9001認證ISO13485.

使用T細胞激活試劑盒時需嚴格遵守以下注意事項，以確保實驗安全性和結果可靠性：  

一、操作規范  

無菌操作  

全程在生物安全柜中操作，避免微生物污染。  

使用無菌耗材（如吸頭、管子、培養板等），避免交叉污染。  

細胞處理  

外周血單核細胞（PBMC）分離需采用密度梯度離心法，避免紅細胞或血小板殘留。  

細胞計數后調整濃度至試劑盒推薦范圍（通常為1-2×10?cells/mL）。  

抗體使用  

按說明書比例添加抗CD3/CD28抗體或磁珠，避免過量導致細胞毒性。  

若為偶聯磁珠的試劑盒，需注意磁場分離強度和時間，避免磁珠殘留。  

二、培養條件控制  

培養基選擇  

使用無血清培養基或含指定血清的培養基，避免未知成分干擾。  

添加IL-2等細胞因子時需嚴格按照推薦濃度（如100-200IU/mL）。  

環境參數  

培養溫度：37℃恒溫。  

CO?濃度：5%（維持培養基pH穩定）。  

濕度：飽和濕度，避免培養基蒸發。  

培養時間與換液  

初始激活時間一般為3-7天，避免過度活化導致細胞衰竭。  

每2-3天半量換液，清除代謝廢物（如乳酸、尿素），補充新鮮培養基和IL-2。  

三、細胞狀態監控  

細胞活力檢測  

每日觀察細胞形態（活化后的T細胞應呈簇狀生長，體積增大）。  

使用臺盼藍或PI染色檢測存活率，要求活細胞比例>90%。  

污染防控  

若出現培養基渾濁、pH驟變或細胞大量死亡，立即終止實驗并排查污染源。  

四、安全性與合規性  

生物安全  

涉及人源性細胞時，需遵循生物安全等級規定。  

銳器（如針頭）及時棄入銳器盒，避免針刺傷。  

試劑管理  

抗體、細胞因子等蛋白類試劑避免反復凍融，分裝后單次使用。  

過期或變質試劑（如沉淀、變色）禁止使用。  

倫理與記錄  

若涉及人類樣本，需取得知情同意并符合倫理委員會要求。  

詳細記錄實驗條件（如細胞來源、試劑批號、操作時間），便于結果追溯。  

五、特殊注意事項  

自身免疫性疾病樣本  

如來自紅斑狼瘡、HIV患者的T細胞，需額外防護（如二級生物安全柜操作）。  

后續應用適配  

若用于CAR-T制備，需確保激活后細胞滿足轉導或編輯要求（如高活性、低凋亡）。  

避免使用含動物成分的試劑（如胎牛血清），以免影響臨床轉化。  

內毒素控制  

所有溶液需測試內毒素水平（<0.5EU/mL），避免細胞焦亡。